Диагностика туберкулёза с помощью метода ПЦР

Расшифровка аббревиатуры ПЦР – полимеразная цепная реакция. Это один из современных методов обнаружения туберкулёзной инфекции. Способ отличается почти стопроцентной точностью в связи с высокой чувствительностью к возбудителям многих заболеваний. Как правило, к описанной методике прибегают при внелёгочных формах туберкулёза. Она нашла своё распространение и в обнаружении инфекций, передающихся половым путём. В качестве биоматериала для анализа используют жидкие среды: мокроту, кровь, слизь и другие.

Процедура выглядит так:

  • полученную материю помещают в состав, который предотвращает свёртывание крови;
  • медики отделяют плазму;
  • теперь под микроскопом можно увидеть возбудителя;
  • осадок перемешивают со специальными веществами;
  • материал помещают в специфические условия (нужна определённая температура);
  • выделяется обновлённая ДНК.

На основании присущей бактериям ДНК доктора устанавливают диагноз и подбирают тактику терапии.

Подобную процедуру можно проводить и младенцам, и взрослым. Поэтому ПЦР часто используют вместо Манту, чтобы быстро диагностировать болезнь. Благодаря тестированию можно увидеть и патогенные микроорганизмы, и их количество. Данным способом обнаруживают туберкулёз различных органов и систем.

Когда нужна альтернатива Манту для детей, какой бывает

Альтернатива пробе Манту для детей необходима при непереносимости компонентов туберкулина, используемого для этого теста. Самые распространенные методы, которые врач может посоветовать для выявления или исключения туберкулеза, указаны в таблице. Они отличаются по специфичности (способности обнаружить именно туберкулезную инфекцию) и чувствительности (возможности поставить диагноз в ранней стадии).

Название метода Специфичность Чувствительность
Диаскинтест 86% 94%
Т-спот 84% 42%

ПЦР (полимеразная цепная реакция)

78% 91%
Квантифероновый тест 96% 89%

Рентгенография грудной клетки

89% 94%

Для сравнения: проба Манту достаточно специфична (87%), но не очень чувствительна (65%). Все методики выявления туберкулезной инфекции не имеют стопроцентной достоверности, поэтому их используют только в комплексе с изучением истории болезни пациента, осмотром, рентгенологическим обследованием родителей (флюорографией).

Рекомендуем прочитать о том, до какого возраста делают Манту. Из статьи вы узнаете, как часто делают пробу Манту в садике и школе, графике проведения пробы, альтернативных способах диагностики в старшем возрасте.

А здесь подробнее о том, в чем опасность большого размера папулы после проведения пробы Манту.

Что можно использовать по закону

По закону можно пройти любой из методов диагностики туберкулеза для ребенка. Родители могут отказаться от проведения пробы Манту, но чаще всего этого делать не стоит без оснований. Обычно поводом для замены на другой способ обследования бывает аллергическая реакция на туберкулин. Тогда врач обычно не советует наиболее близкий аналог – Диаскинтест. Лучше всего провести один из анализов крови: квантифероновый тест, Т-спот, ПЦР.

Возьмут ли в сад с альтернативной пробой

Для детского сада подходит проба Манту по-новому, то есть ее ближайший аналог, его название – Диаскинтест. Они очень похожи по принципу проведения и оценке. Перед поступлением в детский коллектив необходима справка от участкового педиатра, и он учитывает любой из методов обследования.

Анализ крови на туберкулез вместо Манту: в каких случаях можно делать

Анализ крови на туберкулез вместо Манту – альтернативный метод исследования ребенка, который помогает выявить заболевание на ранней стадии развития. Его проводят при невозможности выполнения традиционной пробы Манту (есть медицинские противопоказания) или по желанию родителей (принципиальный отказ от прививок).

Можно сделать и общий анализ крови, но он покажет присутствие палочки Коха в организме (возбудитель туберкулеза) только в том случае, когда патология уже прогрессирует

Даже специфическое исследование крови имеет свои плюсы и минусы, но важно, что анализ покажет и другие заболевания ребенка

Рекомендуем прочитать о том, какая может быть альтернатива Манту для детей. Из статьи вы узнаете, когда нужна альтернатива Манту, преимуществах и недостатках Диаскинтеста, Т-спот анализа, ПЦР, квантиферонового теста.

А здесь подробнее о том, через сколько дней проверяют Манту.

Противопоказания к пуговке

Одно из основных показаний к проведению анализа крови на туберкулез – противопоказания к пробе Манту:

  • дерматологические заболевания на этапе манифестации (обострения);
  • эпилепсия, даже если она пребывает в стадии длительной медикаментозной ремиссии;
  • аллергическая реакция в анамнезе, если она находится в стадии прогрессирования;
  • любые заболевания, перенесенные менее 30 дней назад;
  • индивидуальная непереносимость туберкулина.

Аллергия

Кроме этого, «пуговку» не ставят детям, если у них имеются признаки даже незначительного ухудшения здоровья: банальный насморк, легкий кашель, субфебрильная температура тела уже являются поводом для сдвигания календаря вакцинации.

Плюсы и минусы метода

Основные преимущества проведения пробы Манту:

  • туберкулин разрешается вводить при хронических заболеваниях сердца, сосудов, органов желудочно-кишечного тракта и опорно-двигательного аппарата;
  • вакцинация безболезненна и проста в исполнении;
  • результат можно оценить через 72 часа.

Но есть и недостатки стандартной проверки ребенка на наличие туберкулеза – реакция на введенный туберкулин часто оказывается ложной. И подобное возможно по многим причинам:

  • неправильное выполнение инъекции – врач слишком глубоко сделал укол;
  • использование негодного препарата – нарушен срок его хранения или правила транспортировки;
  • неправильный уход за местом инъекции – ребенок чесал «пуговку», случайно намочил, употреблял в пищу гипераллергенные продукты, долгое время пребывал под прямыми лучами солнца;
  • стремительно развивающаяся аллергия на туберкулин;
  • невыдержанный период временного отвода от прививок по причине перенесенных заболеваний.

Какие бывают анализы крови на туберкулез?

Общество фтизиатров Российской Федерации вместе с Министерством здравоохранения признает IGRA-тесты полноценной альтернативой кожным туберкулиновым пробам при диагностике туберкулеза. Это
.

Среди лицензированных методов проверки крови на туберкулез есть две разновидности, обе относятся к категории иммуноферментных анализов (ИФА). Их можно сделать и в платных клиниках, и в государственных противотуберкулезных учреждениях

QuantiFERON-TB

Оценивает количество вырабатываемого γ-интерферона. Для этого из образца крови выделяются иммунные T-клетки, которые в пробирке обрабатываются антигенами ESAT-6 и CFP-10, характерными для палочки Коха.

Нормой считается отрицательный результат, на его основе врач-фтизиатр имеет право выдать справку об отсутствии у ребенка туберкулеза.

У этого метода есть свои ограничения:

  • Он не позволяет различить латентную и активную форму болезни;

  • Не позволяет определить стадию туберкулеза и степень инфицированности.

При этом преимущества более чем очевидны:

  1. Достаточно быстрый тест. В частных клиниках его в среднем делают за 24 часа;

  2. Высокая чувствительность и низкая возможность ложноположительного результата;

  3. Нет реакции на прививку БЦЖ;

  4. Нет противопоказаний.

Т-спот (T-SPOT.TB)

В этом случае подсчитывают количество самих T-лимфоцитов в крови, которые производят гамма-интерферон. В остальном принцип схожий, с предыдущим тестом.

Анализ Т-спот также не реагирует с БЦЖ, а точность метода достигает 97%. Однако он также не позволяет различить латентную и активную форму заболевания. Впрочем, нормой для здорового человека должен быть отрицательный результат


Designed by Freepik

Замена Манту – Диаскинтест: что это, что лучше покажет результат

Диаскинтест относится также к туберкулинодиагностике, как и проба Манту, поэтому считается лучшей заменой. Шприцом с тонкой иглой в кожу вводят всего 1 дозу очищенного туберкулина. Результат оценивают через 72 часа. Специфичность теста гораздо выше, так как вводится туберкулин без белковых примесей, вызывающих аллергические реакции.

Важная особенность: этот метод помогает определить, является ли повышенная чувствительность проявлением заражения микобактерией или проведенной плановой вакцинацией. Поэтому его могут назначить при сомнительных результатах Манту.

Диаскинтест позволяет наиболее объективно провести исследование для пациентов со сниженной иммунной защитой, сахарным диабетом, принимающим гормоны и другие препараты для подавления иммунитета.

Как и проба Манту, этот кожный тест подходит для оценки проведенной терапии (профилактической или специфической противотуберкулезной). На основании данных Диаскинтеста не ставится диагноз. При получении сомнительного или положительного итога назначается дополнительное обследование (осмотр фтизиатра, рентгенография, посев мокроты).

Диаскинтест гораздо реже вызывает аллергические реакции, чем проба Манту, но они не исключены полностью. Бывает кожная сыпь, зуд, спазм бронхов, отечность кожи, а в тяжелых случаях шоковое состояние. На 1-2 дня после теста возможно небольшое повышение температуры, появление головной боли, общая слабость.

Смотрите в этом видео о преимуществах Диаскинтеста, в каких случаях его проводят:

https://youtube.com/watch?v=4if1FUFzTOU

Проба Манту и диаскинтест: чем отличаются и что покажут?

Впервые с вакциной против туберкулёза — БЦЖ (от англ. BCG, бацилла Кальметта-Герена) новорождённые сталкиваются ещё в роддоме. Повторная ревакцинация необходима в возрасте до 7 лет — для этого используется проба Манту. Что представляет собой проба Манту и зачем она нужна?

Первое, что нужно помнить, — это не прививка и никакой нагрузки на иммунитет она не даёт. Реакция Манту — это этап защиты от туберкулёза, способ избежать развития болезни и возможных осложнений. Подкожно ребёнку вводится туберкулин (разрушенный возбудитель туберкулёза высокой очистки), а результат оценивается в месте введения спустя несколько дней. Если ребёнок контактировал с больным туберкулёзом, то последует местная реакция, папула будет увеличиваться в размерах. Проба Манту необходима, чтобы отправить ребёнка на повторную ревакцинацию в 7 лет.

Проба Манту показывает наличие микобактерий туберкулёза в организме, а диаскинтест — их активность. Туберкулин, который используется для пробы Манту, содержит около 250 различных белков, реагирующих на палочку Коха. Диаскинтест более очищенный, точный и менее аллергенный. В его составе только два белка, содержащиеся в тех штаммах, которые вызывают туберкулёз. Существует и альтернатива кожным пробам – Т-SPOT. Наличие в организме микобактерий туберкулёза выявляют с помощью анализа крови, без вмешательства в организм человека. Кровь исследуют в лабораторных условиях. Подробнее об анализе T-SPOT читайте в нашем материале.

Микобактерии туберкулёза в организме. Это опасно?

Опасно ли наличие микобактерий в организме? Микобактерии туберкулёза в организме могут быть выявлены у многих (по статистике в России они встречается у 95% населений!), но это не означает, что человек болен туберкулёзом или заболеет им. При хорошем иммунитете эти бактерии уничтожаются организмом или находятся в спящем состоянии и никакой угрозы организму не несут.

Проба Манту показывает состояние противотуберкулёзного иммунитета. Если результат положительный, то проводится диаскинтест для исключения аллергических реакций. Если у ребёнка положительный результат на диаскинтест, то это означает, что иммунитет не справляется с полученной инфекцией и присутствует латентная форма туберкулёза. Потребуется осмотр фтизиатра, дополнительное обследование и лечение, чтобы туберкулёз не перешёл в активную форму. Важный момент: латентный туберкулёз — это не болезнь, а наличие в организме человека микобактерий в стадии активного размножения. Очагов болезни нет, но если не провести терапию, то через пару лет латентный туберкулёз перейдёт в активную стадию. Иными словами, болезнь нужно «поймать» на латентной стадии, когда инфицирование имеет место быть, но в лёгких не обнаружены изменённые участки.

Может ли проба Манту дать ложный результат при соприкосновении с водой? Долгие годы был жив стереотип о том, что на это может повлиять вода или употребление определённых продуктов.

Анализы крови

Манту можно заменить анализом крови — информативным и удобным методом. Способ предполагает наблюдение за реакцией крови после забора только за пределами организма (в пробирке). Методика отличается высокой чувствительностью и помогает быстро выявить наличие возможной инфекции.

Такая замена Манту необходима, если туберкулинодиагностика ранее дала сомнительный результат и требуется замена пробы аналогами. Отличительной особенностью методики является возможный многократный повтор анализа, он помогает не только констатировать присутствие инфекции, но проследить за течением инфекционного процесса.

Иммуноферментная диагностика

Лабораторный способ, заменяющий привычную пробу, используется для того, чтобы установить вялотекущую или скрытую инфекцию. Его применяют вместо Манту, кода есть подозрение что существует не легочная форма туберкулеза.

В основу метода легла иммунохимическая реакция антител крови на присутствие антигенов — чужеродных частиц или веществ, представляющих опасность. В лаборатории в порцию крови вносят готовые антигены и следят за происходящей реакцией. Метод позволяет не только выявить наличие инфекции, но и количество антител, способных бороться с болезнью.

ПЦР

Можно заменить Манту точным, с высокой чувствительностью, методом, который способен обнаруживать нехарактерные для данного организма ДНК. Выявление возбудителя происходит оперативно даже в том случае, когда концентрация чужеродного белка в сыворотке крови небольшая. Полимерная цепная реакция, положенная в основу методики, обнаруживает чужеродный белок с гарантией 100%.Какие по Вашему мнению наиболее важные факторы при выборе медицинского учреждения?

Способ используется для определения наличия возбудителя, когда вероятность заболевания высока (например, ребенок вынужден жить с больным туберкулезом родственником), а остальные методы дают отрицательный ответ. При этом для проведения высокоточного анализа требуется сложное оборудование для биологической очистки инструментов.

Для анализа необязательно нужна кровь, достаточно мазка со слизистой оболочки гортани или мокроты.

ПЦР используют в районах, где количество заболевших невысокое, если распространение болезни большое, нельзя рассчитывать на достоверный результат.

Рентгенография

Аналог пробы Манту предполагает изучение состояния легких в промежутках между фазами вакцинации при помощи рентгеновского излучения. В результате получается снимок, на котором видны участки легочных структур с разной плотностью (затемненные и светлые). Правильная расшифровка снимка помогает установить наличие изменений в легких, причину, степень патологии, ее размер и локализацию.

Эффективность метода зависит от мощности аппаратуры и квалификации фтизиатра, способного грамотно интерпретировать результат обследования. Рентгенография не позволяет диагностировать заболевание на стадии инкубационного периода, когда преобразования в легких еще не видны.

Как еще проверить ребенка на туберкулез без Манту, какие анализы сдать

Проверить ребенка на туберкулез без Манту можно еще несколькими способами:

  • Рентгенография – достаточно информативный метод исследования, но категорически не подходит для маленьких детей. Негативно влияет на процесс развития ребенка, поэтому назначается только в исключительных случаях. Рентгенография показывает уже имеющиеся очаги в легких, не выявляет другие формы заболевания, дает практически мгновенный результат.
  • Квантеферон-тест – не имеет противопоказаний, полностью безопасен, провоцирует ответ иммунной системы на тубинфекцию. Положительный результат теста не всегда подтверждает наличие инфекции в организме, а отрицательный совсем не исключает активного заболевания. Может применяться для диагностики латентной формы туберкулеза и сразу после постановки БЦЖ. Достоверность результата – 99%, но имеется и высокая вероятность получения ошибочного ответа.

  • Проба Суслова – анализ крови, подходит для диагностики у детей с аллергией в анамнезе и в младшем возрасте. Проба абсолютно безопасная, но отличается слабой чувствительностью к антителам. Считается малораспространенной, а болезнь с локализацией в легких таким методом выявить практически невозможно.
  • Диаскинтест – основан на реакции кожного покрова на специфический туберкулезный белок, считается полным аналогом пробы Манту, но максимально усовершенствованной. Результат врачи оценивают через 72 часа – измеряют диаметр папулы. Метод простой, точный, но отличается большой вероятностью получения ложноотрицательного результата.
  • Методика Циля-Нельсена – пациент сдает на исследование слюну. Анализ сложный, подразумевает проведение нескольких химических реакций. Безопасен, может проводиться при имеющейся аллергии и наличии хронических внутренних патологий. Результатом будет простое фиксирование присутствия палочки Коха без четкого определения стадии заболевания и локализации.

Рекомендуем прочитать о том, обязательно ли делать Манту. Из статьи вы узнаете, когда и зачем делают Манту, обязательно ли ставить для сада и школы, когда можно не делать пробу.

А здесь подробнее о том, как написать отказ от Манту.

Проба Манту – не единственный метод диагностики туберкулеза, родители вправе выбирать анализы крови. Их результаты могут использоваться для поступления в школу и сад, в большинстве случаев они будут более достоверными.

Насколько достоверен результат ПЦР на туберкулез вместо Манту ребенку

Альтернативой классической диагностики считается ПЦР на туберкулез – вместо Манту ребенку делают забор крови. Исследуется полимеразная цепная реакция, которая:

  • отличается высокой чувствительностью;
  • способна показать любые формы туберкулеза.

ПЦР на туберкулез не проводят в послепрививочный период, сразу после противотуберкулезной терапии. В последнем случае анализ покажет положительный результат, потому что после лечения некоторое время в организме еще находятся палочки Коха.

Такое исследование позволяет выявить присутствие возбудителя патологии на первых стадиях заражения, даже если он проник в организм буквально час назад. ПЦР эффективен для диагностики рецидива. Метод абсолютно безопасный, занимает минимальное количество времени и дает надежный, достоверный результат.

Как диагностируют туберкулёз?

Существуют инструментальные и лабораторные методы диагностики туберкулеза. К первым относятся рентгенография, МРТ и КТ. С их помощью врач визуально оценивает состояние легких и очаги поражения. Их используют при активной форме туберкулеза в сочетании с ПЦР-диагностикой и микроскопическими исследованиями мокроты. Из нее выделяют культуру микобактерий M. tuberculosis (палочки Коха)


Designed by Pixabay

Однако при латентной форме болезни возбудитель попросту отсутствует в биологических жидкостях. Клинических проявлений также может не быть. Поэтому в таком случае диагностируют туберкулез с помощью проверки иммунной реакции

В этом случае применяются две стандартных методики:

  • In vivo. Это так называемые провокативные тесты, когда под кожу пациента вводится специфический белок-аллерген. Та самая проба Манту (или проба Пирке) и «Диаскинтест» – из этой категории;

  • In vitro. Здесь изучается образец крови из вены больного. Цель – оценить реакцию иммунных T-клеток на антигены палочки Коха. В этом случае организм будет выделять белок гамма-интерферон. Такие тесты называются квантифероновыми (Interferon-Gamma Release Assays, IGRA). Другая разновидность тестов оценивает количество T-лимфоцитов, выделяющих интерферон.

Типы лабораторных анализов крови на туберкулез вместо Манту ребенку

Существует несколько типов лабораторных анализов крови на туберкулез вместо Манту ребенку – ИФА, биохимический, Т-СПОТ. Каждый имеет свои преимущества и недостатки.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Это анализ на антитела, который отличается простотой, высокой чувствительностью и высокой стоимостью. Основа анализа – избирательность антител, которые в реакцию вступают только с определенными антигенами. На окончательный результат исследования могут повлиять аллергены, некоторые продукты питания и лекарственные препараты. Особенности ИФА:

  • никогда не дает ложноположительный результат;
  • может дать ложноотрицательную реакцию;
  • наиболее эффективен в отношении диагностирования туберкулеза костей;
  • не дает возможности врачам определить стадию болезни.

Принцип метода ИФА

Иммуноферментный анализ не дает 100%-ную гарантию проверки на туберкулез, потому что даже присутствие антител в крови к инфекции не в каждом случае свидетельствует о наличии болезни.

Биохимический анализ

На любой стадии заболевания, особенно, если оно протекает в скрытой форме, такое исследование будет абсолютно неинформативным. Точный результат можно получить только при острой форме патологии – в крови будет резко понижена концентрация альбумина и глобулина. На фоне таких показателей подтверждение именно туберкулеза даст повышенное количество лейкоцитов и эозинофилов.

Биохимический анализ часто применяется для мониторинга динамики заболевания при проводимой терапии. Но если после проведения пробы Манту у врача остаются сомнения, то такое исследование все равно не даст уточнений.

Т-СПОТ исследование

Самый достоверный метод диагностирования потому, что в 97% случаев правильно выявляет патологию. Забранный у пациента образец крови изучается, лаборант определяет количество лимфоцитов, которые участвуют в продуцировании гамма-интерферона. Если есть иммунный ответ, то это стопроцентное подтверждение присутствия в организме туберкулезной инфекции.

Т-СПОТ исследование подходит для диагностики даже скрытой формы патологии, а также у аллергиков. Результат никогда не бывает ложноположительным, не зависит от сроков постановки БЦЖ и не имеет противопоказаний к проведению.